多年前的那场高考，让我今天能在这里数……精子

高考来啦，啊！好紧张~
 
还好还好~多年前我已废寝忘食披肝沥胆快马加鞭焚膏继晷，凭借我奇谲诡异的智商及超凡脱俗的毅力，力排众阻力压万难突围高考千万大军，在独木桥另一边笑傲江湖，从此在江湖上留下姐的传说~~~
 
这是一年一度的全中国乃至全世界最为相对公平的事件，一个人的人生，就此改变~~~就像我，多年前的那场高考，让我迈进了心仪的学校，踏上了生物这条不归路，今天在这里定定心心的数可爱的……精子~
 
别告诉我你脑中出现了这个字~
 
数精子是一项伟大的基础科研工作~~~精子与卵细胞在体外受精形成受精卵，是发育生物学研究胚胎最常用的技术手段，其需要将一定数量的卵细胞与成比例浓度的精子混合在一个培养体系中，完成受精过程；所以数精子，是发育生物学研究中最基础和重要的技术手段，我，一个蕙质兰心岁月静好的女孩纸，就经常干这事~
 
但是，目前实验室常用确定精子浓度的方法主要是通过目测观察和血球计数板计数两种，前者精确度较低，后者因为精子粒径小且会游动，好难数啊~
 
幸亏有JIMBIO CC 细胞计数仪神器！其利用流式库尔特原理，替代原始方法，提高计数效率，可以针对精子计数给出准确客观的计数结果~
 
以下为JIMBIO CC Cell Counter细胞计数仪应用方案第4期--精子计数方案，拯救精子计数难题的神器来啦！
 

1. 材料与方法
 1.1 材料
    精子来源：猪精液
稀释液：猪乐道精液稀释粉 50 g/1 L。

表1 mTBM培养基配方

受精液：将15ml 的mTBM储液放入50 ml 的锥形管中，添加0.01 g caffeine 
   （终浓度：2 mM），和0.03 g BSA（终浓度 2 %），混匀，在5 % CO2培养
    箱中平衡24 h后，用作受精。
 1.2 精子悬液的制备：
    1.2.1 将新鲜猪精液用1.1中的稀释液稀释5倍，在18℃保存。
1.2.2 用受精液将1.2.1得到的精子稀释液进一步稀释10~100倍，进行计数。

2. 结果与分析

 
图1.  精子悬液计数

表2 计数仪计数结果与血球计数板对比

从上述图表中可看出，计数仪测得颗粒平均直径6 μm左右，且集中度高，与实际精子粒径相当。与计数板结果比对中，从1.0*10^5至1.0*10^6左右的浓度梯度中，计数仪技术结果与血球计数板结果相当，且数值波动较小。

因为1.0*10^5浓度已相对较低，在此浓度以下，机器与人工计数会出现较高的数值波动，建议控制稀释倍数，在此浓度之上进行计数。（生物谷 Bioon.com）