J Pharmacol Toxicol Methods：优化的乳酸脱氢酶释放试验用于筛选神经类候选药物

2015-02-16 范伟译 MedSci原创

乳酸脱氢酶药物

背景：乳酸脱氢酶(LDH)释放的定量测定是一种广泛接受的用于测定细胞活性和晚期细胞凋亡的实验。商业性的LDH测定试剂盒主要缺点包括专有配方、有限的优化选择以及高成本，导致了研究应用中重现性的限制。 方法：我们描述了一个新颖的，基于使用者的定制的LDH测定用于筛选胶质保护类候选药物，与其他细胞类型和实验程序相比具有广泛的适用性。 结果：我们开发了一个新颖的、可高度重复性的LDH释放试剂盒，它相比

背景：乳酸脱氢酶(LDH)释放的定量测定是一种广泛接受的用于测定细胞活性和晚期细胞凋亡的实验。商业性的LDH测定试剂盒主要缺点包括专有配方、有限的优化选择以及高成本，导致了研究应用中重现性的限制。

方法：我们描述了一个新颖的，基于使用者的定制的LDH测定用于筛选胶质保护类候选药物，与其他细胞类型和实验程序相比具有广泛的适用性。

结果：我们开发了一个新颖的、可高度重复性的LDH释放试剂盒，它相比于商用的具有类似性能的试剂盒更经济。该试剂盒通过测定在C6星形神经胶质瘤细胞上6-羟基-2,5,7,8-四甲基色烷-2-羧酸抗氧化防护叔丁基化过氧氢-诱导的氧化应激实验进行验证。试剂盒性能是通过直接的比较以及兼容其他方法测定细胞的存活能力，即溴化噻唑蓝四氮唑和 6-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯试验。

与现有的方法比较：新颖的定制的试剂盒和商用的试剂盒CytoTox96®(Promega, Madison, WI)的测定结果在统计学上没有的显著差异。

结论：这个新颖的定制的LDH释放试剂盒具有可重复性的定量测定细胞的存活能力，且成本相比于商用的试剂盒更便宜(约25倍)。除了与商用试剂盒相比，其对所有实验组分和操作的详细描述，在实验条件和设计上提供了更优的控制方案。我们提供一个详细的标准操作程序，这使得我们提供的新颖的试剂盒能较为容易的适应实验的要求。

原始出处

Kaja S1, Payne AJ2, Singh T2, Ghuman JK2, Sieck EK2, Koulen P2.An optimized lactate dehydrogenase release assay for screening of drug candidates in neuroscience. J Pharmacol Toxicol Methods. 2015 Feb 11. pii: S1056-8719(15)00018-0. doi: 10.1016/j.vascn.2015.02.001.

作者：范伟译



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